4-Nitrofenil beta-D-galactopiranósido CAS:200422-18-0

Efecto: ONPG es un sustrato utilizado específicamente para detectar la presencia y actividad de la enzima β-galactosidasa.Cuando la enzima β-galactosidasa está presente y activa, escinde el ONPG en dos productos: o-nitrofenol y un derivado de galactosa.La liberación de o-nitrofenol da como resultado un cambio de color amarillo, que puede medirse con un espectrofotómetro.

Aplicación: ONPG tiene varias aplicaciones en la investigación de biología molecular y bioquímica:

Determinación de la actividad de la β-galactosidasa: ONPG se usa comúnmente para medir y cuantificar la actividad de la enzima β-galactosidasa.La tasa de formación de o-nitrofenol, que es directamente proporcional a la actividad enzimática, se puede medir espectrofotométricamente.

Expresión y regulación genética: ONPG se utiliza a menudo en experimentos relacionados con estudios de expresión y regulación genética.Se utiliza con frecuencia en ensayos de proteínas de fusión, como el sistema de fusión lacZ de uso común, para estudiar la expresión de genes bajo el control de promotores específicos.La actividad beta-galactosidasa medida con ONPG proporciona información sobre el nivel de expresión genética.

Detección de actividad de β-galactosidasa: ONPG se puede utilizar como método de detección colorimétrico en tecnología de ADN recombinante para identificar la presencia y funcionalidad del gen LacZ, que codifica la β-galactosidasa.Este método de detección ayuda a identificar clones que contienen el gen de interés.

Estudios de cinética enzimática: ONPG también es útil para estudiar la cinética de la enzima β-galactosidasa.Al medir la velocidad de reacción enzima-sustrato a diferentes concentraciones de sustrato, es posible determinar parámetros cinéticos como las constantes de Michaelis-Menten (Km) y las velocidades máximas de reacción (Vmax).