Fenilgalactósido CAS: 2818-58-8

Efecto sobre la actividad enzimática: el fenilgalactósido se usa comúnmente para medir la actividad de la enzima β-galactosidasa.Cuando el fenilgalactósido es hidrolizado por la β-galactosidasa, libera p-nitrofenol.La acumulación de p-nitrofenol se puede medir cuantitativamente, lo que proporciona información sobre la actividad de la β-galactosidasa.Este efecto se aprovecha en aplicaciones como ensayos enzimáticos y sistemas de detección.

Análisis de expresión genética: el fenilgalactósido se utiliza a menudo como sustrato en experimentos de biología molecular para estudiar la expresión genética.El gen lacZ, que codifica la β-galactosidasa, suele fusionarse con secuencias reguladoras de otros genes de interés.La expresión del gen lacZ y la hidrólisis del fenilgalactósido por la β-galactosidasa pueden indicar el patrón de expresión y el nivel del gen diana que se está estudiando.

Sistemas de detección: el fenilgalactósido es un componente importante de los sistemas de detección que utilizan la actividad de la β-galactosidasa.Un ejemplo ampliamente conocido es el método de detección azul-blanco, que se utiliza para identificar células recombinantes o transformadas en experimentos de biología molecular.Las colonias que han absorbido con éxito el ADN recombinante o se han sometido a una recombinación genética expresarán β-galactosidasa, lo que provocará la hidrólisis del fenilgalactósido y la formación de un color azul.

Purificación de proteínas: en algunos casos, el fenilgalactósido se puede utilizar como ligando para la cromatografía de afinidad para purificar proteínas que se unen específicamente a la β-galactosidasa o son activadas por ella.La proteína de interés puede tener una etiqueta de afinidad o una etiqueta de fusión que contenga un dominio de unión a β-galactosidasa.Al pasar la mezcla de proteínas a través de una columna con fenilgalactósido inmovilizado, la proteína deseada puede retenerse selectivamente y posteriormente eluirse.