El fenilgalactósido, también conocido como p-nitrofenil β-D-galactopiranósido (pNPG), es un sustrato sintético que se utiliza frecuentemente en experimentos bioquímicos y de biología molecular.Se utiliza habitualmente para detectar y medir la actividad de la enzima β-galactosidasa.
Cuando el fenilgalactósido es hidrolizado por la β-galactosidasa, libera p-nitrofenol, que es un compuesto de color amarillo.La liberación de p-nitrofenol se puede medir cuantitativamente utilizando un espectrofotómetro, ya que la absorbancia del p-nitrofenol se puede detectar a una longitud de onda de 405 nm.